1. Skop: Din il-proċedura għandha l-għan li tipprovdi proċedura standardizzata għal operazzjonijiet asettiċi u l-protezzjoni ta' kmamar sterili.
2. Ambitu tal-applikazzjoni: laboratorju tal-ittestjar bijoloġiku
3. Persuna Responsabbli: Superviżur tal-QC Tester
4. Definizzjoni: Xejn
5. Prekawzjonijiet ta' sigurtà
Wettaq operazzjonijiet asettiċi b'mod strett biex tevita kontaminazzjoni mikrobjali; l-operaturi għandhom jitfu l-lampa UV qabel ma jidħlu f'kamra sterili.
6. Proċeduri
6.1. Il-kamra sterili għandha tkun mgħammra b'kamra tal-operazzjoni sterili u kamra buffer. L-indafa tal-kamra tal-operazzjoni sterili għandha tilħaq il-klassi 10000. It-temperatura ta' ġewwa għandha tinżamm f'20-24°C u l-umdità għandha tinżamm f'45-60%. L-indafa tal-bank nadif għandha tilħaq il-klassi 100.
6.2. Il-kamra sterili għandha tinżamm nadifa, u huwa strettament ipprojbit li takkumula debris biex tevita l-kontaminazzjoni.
6.3. Evita b'mod strett il-kontaminazzjoni tat-tagħmir kollu tal-isterilizzazzjoni u l-mezzi tal-kultura. Dawk li huma kkontaminati għandhom jieqfu jużawhom.
6.4. Il-kamra sterili għandha tkun mgħammra b'diżinfettanti b'konċentrazzjoni operattiva, bħal soluzzjoni ta' 5% kresol, 70% alkoħol, soluzzjoni ta' 0.1% klormetjonina, eċċ.
6.5. Il-kamra sterili għandha tiġi sterilizzata regolarment u mnaddfa b'diżinfettant xieraq biex jiġi żgurat li l-indafa tal-kamra sterili tissodisfa r-rekwiżiti.
6.6. L-istrumenti, l-istrumenti, il-platti u oġġetti oħra kollha li jeħtieġ li jiddaħħlu fil-kamra sterili għandhom ikunu mgeżwra sewwa u sterilizzati b'metodi xierqa.
6.7. Qabel ma jidħlu fil-kamra sterili, l-istaff irid jaħsel idejh bis-sapun jew bid-diżinfettant, u mbagħad jibdel ħwejjeġ tax-xogħol speċjali, żraben, kpiepel, maskri u ingwanti fil-kamra tal-bafer (jew jimsaħ idejh mill-ġdid b'70% etanol) qabel ma jidħlu fil-kamra sterili. Wettaq l-operazzjonijiet fil-kamra tal-batterji.
6.8. Qabel ma tintuża kamra sterili, il-lampa ultravjola fil-kamra sterili għandha tkun mixgħula għall-irradjazzjoni u l-isterilizzazzjoni għal aktar minn 30 minuta, u l-bank tat-tindif għandu jkun mixgħul biex jonfoħ l-arja fl-istess ħin. Wara li titlesta l-operazzjoni, il-kamra sterili għandha titnaddaf fil-ħin u mbagħad tiġi sterilizzata bid-dawl ultravjola għal 20 minuta.
6.9. Qabel l-ispezzjoni, l-imballaġġ ta' barra tal-kampjun tat-test għandu jinżamm intatt u m'għandux jinfetaħ biex tiġi evitata l-kontaminazzjoni. Qabel l-ispezzjoni, uża blalen tal-qoton b'70% alkoħol biex tiddiżinfetta l-wiċċ ta' barra.
6.10. Matul kull operazzjoni, għandu jsir kontroll negattiv biex tiġi vverifikata l-affidabbiltà tal-operazzjoni asettika.
6.11. Meta tassorbi likwidu batterjali, trid tuża ballun tal-ġbid biex tassorbih. Tmissx it-tiben direttament b'ħalqek.
6.12. Il-labra tal-inokulazzjoni trid tiġi sterilizzata bil-fjamma qabel u wara kull użu. Wara li tkessaħ, il-kultura tista' tiġi inokulata.
6.13. It-tiben, it-tubi tat-test, il-platti Petri u utensili oħra li fihom likwidu batterjali għandhom jiġu mxarrba f'barmil ta' sterilizzazzjoni li fih soluzzjoni ta' 5% Lysol għad-diżinfezzjoni, u jinħarġu u jitlaħalħu wara 24 siegħa.
6.14. Jekk ikun hemm likwidu batterjali mxerred fuq il-mejda jew l-art, għandek tferra’ immedjatament soluzzjoni ta’ 5% aċidu karboliku jew 3% Lysol fuq iż-żona kkontaminata għal mill-inqas 30 minuta qabel ma tittrattaha. Meta l-ħwejjeġ tax-xogħol u l-kpiepel ikunu kkontaminati b’fluwidu batterjali, għandhom jitneħħew immedjatament u jinħaslu wara sterilizzazzjoni bil-fwar bi pressjoni għolja.
6.15. L-oġġetti kollha li fihom batterji ħajjin iridu jiġu diżinfettati qabel ma jitlaħalħu taħt il-vit. Huwa strettament ipprojbit li tniġġes id-drenaġġ.
6.16. L-għadd ta' kolonji f'kamra sterili għandu jiġi ċċekkjat kull xahar. Bil-bank nadif miftuħ, ħu numru ta' platti petri sterili b'dijametru intern ta' 90 mm, u injetta b'mod asettiku madwar 15 ml ta' mezz ta' kultura ta' agar nutrijenti li jkun ġie mdewweb u mkessaħ għal madwar 45°C. Wara s-solidifikazzjoni, poġġih rasu 'l isfel f'temperatura ta' 30 sa 35°C għal 48 siegħa f'inkubatur ta' ℃. Wara li tipprova l-isterilità, ħu 3 sa 5 platti u poġġihom fuq ix-xellug, fin-nofs u fil-lemin tal-pożizzjoni tax-xogħol. Wara li tiftaħ l-għatu u tesponihom għal 30 minuta, poġġihom rasu 'l isfel f'inkubatur ta' 30 sa 35°C għal 48 siegħa u oħroġhom. Eżamina. L-għadd medju ta' batterji varji fuq il-platt f'żona nadifa tal-klassi 100 m'għandux jaqbeż kolonja waħda, u l-għadd medju f'kamra nadifa tal-klassi 10000 m'għandux jaqbeż it-3 kolonji. Jekk il-limitu jinqabeż, il-kamra sterili għandha tiġi diżinfettata sewwa sakemm spezzjonijiet ripetuti jissodisfaw ir-rekwiżiti.
7. Irreferi għall-kapitlu (Metodu ta' Spezzjoni tal-Isterilità) f'"Metodi ta' Spezzjoni tal-Iġjene tal-Mediċini" u "Prattiki Operattivi Standard taċ-Ċina għall-Ispezzjoni tal-Mediċini".
8. Dipartiment tad-Distribuzzjoni: Dipartiment tal-Ġestjoni tal-Kwalità
Gwida teknika għal kamra nadifa:
Wara li niksbu ambjent sterili u materjali sterili, irridu nżommu stat sterili sabiex nistudjaw mikroorganiżmu speċifiku magħruf jew nużaw il-funzjonijiet tiegħu. Inkella, diversi mikroorganiżmi minn barra jistgħu faċilment jitħalltu. Il-fenomenu tat-taħlit ta' mikroorganiżmi irrilevanti minn barra jissejjaħ batterji kontaminanti fil-mikrobijoloġija. Il-prevenzjoni tal-kontaminazzjoni hija teknika kritika fix-xogħol mikrobijoloġiku. L-isterilizzazzjoni kompleta minn naħa waħda u l-prevenzjoni tal-kontaminazzjoni min-naħa l-oħra huma żewġ aspetti tat-teknika asettika. Barra minn hekk, irridu nipprevjenu l-mikroorganiżmi li qed jiġu studjati, speċjalment mikroorganiżmi patoġeniċi jew mikroorganiżmi ġenetikament inġinerizzati li ma jeżistux fin-natura, milli jaħarbu mill-kontenituri sperimentali tagħna fl-ambjent estern. Għal dawn il-finijiet, fil-mikrobijoloġija, hemm ħafna miżuri.
Kamra sterili ġeneralment hija kamra żgħira mwaqqfa apposta fil-laboratorju tal-mikrobijoloġija. Tista' tinbena b'folji u ħġieġ. Iż-żona m'għandhiex tkun kbira wisq, madwar 4-5 metri kwadri, u l-għoli għandu jkun madwar 2.5 metri. Għandha titwaqqaf kamra buffer barra l-kamra sterili. Il-bieb tal-kamra buffer u l-bieb tal-kamra sterili m'għandhomx iħarsu fl-istess direzzjoni biex jipprevjenu li l-fluss tal-arja jdaħħal batterji varji. Kemm il-kamra sterili kif ukoll il-kamra buffer għandhom ikunu ermetiċi. It-tagħmir tal-ventilazzjoni ta' ġewwa għandu jkollu apparati ta' filtrazzjoni tal-arja. L-art u l-ħitan tal-kamra sterili għandhom ikunu lixxi, diffiċli biex iżommu l-ħmieġ u faċli biex jitnaddfu. Il-wiċċ tax-xogħol għandu jkun livellat. Kemm il-kamra sterili kif ukoll il-kamra buffer huma mgħammra b'dwal ultravjola. Id-dwal ultravjola fil-kamra sterili huma metru 'l bogħod mill-wiċċ tax-xogħol. L-istaff li jidħol fil-kamra sterili għandu jilbes ħwejjeġ u kpiepel sterilizzati.
Bħalissa, kmamar sterili jeżistu l-aktar fil-fabbriki tal-mikrobijoloġija, filwaqt li l-laboratorji ġenerali jużaw bank nadif. Il-funzjoni ewlenija tal-bank nadif hija li juża apparat tal-fluss tal-arja laminari biex ineħħi diversi trabijiet żgħar inklużi mikro-organiżmi fuq il-wiċċ tax-xogħol. L-apparat elettriku jippermetti li l-arja tgħaddi mill-filtru hepa u mbagħad tidħol fil-wiċċ tax-xogħol, sabiex il-wiċċ tax-xogħol dejjem jinżamm taħt il-kontroll tal-arja sterili li tiċċirkola. Barra minn hekk, hemm purtiera tal-arja b'veloċità għolja fuq in-naħa qrib in-naħa ta' barra biex tipprevjeni li tidħol arja batterjali esterna.
F'postijiet b'kundizzjonijiet diffiċli, jistgħu jintużaw ukoll kaxxi sterili tal-injam minflok bank nadif. Il-kaxxa sterili għandha struttura sempliċi u hija faċli biex tiċċaqlaq. Hemm żewġ toqob fuq quddiem tal-kaxxa, li huma mblukkati minn bibien push-pull meta ma jkunux qed joperaw. Tista' testendi idejk 'il ġewwa waqt l-operazzjoni. Il-parti ta' fuq ta' quddiem hija mgħammra bi ħġieġ biex tiffaċilita t-tħaddim intern. Hemm lampa ultravjola ġewwa l-kaxxa, u l-utensili u l-batterji jistgħu jitpoġġew minn bieb żgħir fuq il-ġenb.
Tekniki operattivi asettiċi bħalissa mhux biss għandhom rwol ċentrali fir-riċerka u l-applikazzjonijiet mikrobijologiċi, iżda jintużaw ukoll ħafna f'ħafna bijoteknoloġiji. Pereżempju, it-teknoloġija transġenika, it-teknoloġija tal-antikorpi monoklonali, eċċ.
Ħin tal-posta: 06 ta' Marzu 2024